目的 通過免疫固定電泳法實驗檢測M蛋白并討論此方法對骨髓瘤診斷的意義。方法 對40例被建議做免疫固定的患者用Sebia電泳儀測血清M蛋白。結果 40例標本中有25例患者免疫固定電泳出現(xiàn)重鏈伴輕鏈成分，經(jīng)25例患者病歷的調查發(fā)現(xiàn)其中18例被確診為多發(fā)性骨髓瘤。結論 免疫固定電泳對多發(fā)性骨髓瘤的診斷具有重要意義。
多發(fā)性骨髓瘤是一種源于前B細胞的骨髓漿細胞惡性增殖性疾病 ，惡性漿細胞分泌大量的單克隆免疫球蛋白，又名副蛋白，M蛋白。一般來說，它可以分為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE、游離輕鏈(Kappa或Lamda)及游離重鏈等7型 。電泳后，它可呈現(xiàn)出一條有特征性的帶(M)。骨髓瘤的患者多以骨病、腎病等繼發(fā)病就診，常被誤診為骨折、腎小球腎炎等疾病。據(jù)不同醫(yī)院統(tǒng)計資料分析，誤診率可達54%～69.1% ，個別醫(yī)院甚至高達100% ，誤診時間短則數(shù)月，長則年余，因此許多患者錯過了最佳治療時期，本實驗旨在說明免疫固定電泳對多發(fā)性骨髓瘤早期診斷和鑒別診斷的意義。
1.2 方法 加樣:取血清10μl點樣(配套的點樣梳)于pH8.8、0.1的瓊脂糖凝膠板(2人份或4人份)上加樣5min，在20W的恒定電流下進行直到42Vh 為止，20℃恒溫由Peltier系統(tǒng)控制(約9min)。加抗血清:在每份標本的6個電泳區(qū)域上各加固定溶液40μl，抗IgG、IgA、IgM、抗 κ、λ(游離和結合)型血清各25μl。然后由機器進行孵育、烘干。染色:先用pH8.8的堿性溶液沖洗膠板3min，然后用紫酸染色，用1‰冰醋酸褪色，烘干。接著又染色，褪色，再褪色，烘干。完畢后觀察結果。
2 結果
應用HYDYASYS電泳儀對40例血標本進行免疫固定，其中25例出現(xiàn)重鏈伴輕鏈成分。收集此25例的病歷其中18例臨床診斷為多發(fā)性骨髓瘤，3例拒做骨穿未確診，2例確診前轉院，2例尚未確診。25例患者的免疫電泳分型結果見表1。
3 討論
多發(fā)性骨髓瘤是一種克隆細胞無控制地積聚的腫瘤。對于多發(fā)性骨髓瘤而言有3項實驗室檢查具有診斷意義:①證實有高濃度單克隆免疫球蛋白或單克隆輕鏈的存在。②發(fā)現(xiàn)骨髓中漿細胞異常增多15%;或有骨髓瘤細胞(幼稚漿細胞)存在。③ 骨骼X線檢查證實有溶骨性病變存在。凡有多發(fā)性骨髓瘤臨床表現(xiàn)及上述二項陽性即可排除其它疾病而確診為多發(fā)性骨髓瘤。其典型表現(xiàn)是骨痛、腎功能損害、貧血及出血現(xiàn)象、高粘滯血癥等。其中骨痛是此病最常見癥狀，此因骨髓瘤細胞分泌細胞因子(白細胞介素-1)、淋巴細胞毒素、腫瘤壞死因子激活破骨細胞，造成骨質疏松病理性骨折而引起。以骨痛為主訴的患者約為65%，在整個病程中出現(xiàn)骨痛者高達88% 以上。但是，能夠引起骨痛的疾病很多如椎間盤突出、腰椎結核、骨腫瘤、甲狀腺功能亢進等，但這些疾病均不能引起M蛋白的出現(xiàn)。骨髓瘤患者的骨骼X線一般表現(xiàn)為彌漫性骨質疏松，基質出現(xiàn)穿鑿樣溶骨性病變以顱骨最為典型 。但對于早期或慢性進展性骨損害來講，X線并不是一種靈敏的方法 ，況且約35%的患者并不是以骨痛為首發(fā)癥狀。因此X線對多發(fā)性骨髓瘤早期診斷不具特別意義，而對于分泌型的患者來說其基本發(fā)病機制就是骨髓中單克隆惡變漿細胞無節(jié)制增殖，浸潤，分泌大量單克隆免疫球蛋白損傷正常組織，因此免疫固定必顯示某種單克隆成分過高。本組4例患者并未出現(xiàn)骨損傷但免疫固定電泳出現(xiàn)異常的球蛋白沉淀線，經(jīng)骨穿后確診為多發(fā)性骨髓瘤。據(jù)報道少數(shù)患者出現(xiàn)局部或泛發(fā)骨質硬化對這種病例診斷，免疫固定起著決定性的意義。
不少患者以腎臟病變?yōu)槭装l(fā)表現(xiàn)，如大量蛋白尿、尿素 氮及肌酐升高而就診于泌尿內科。本組3例患者診斷為慢性腎炎、尿毒癥而收住泌尿病房按腎小球腎炎治療。后經(jīng)我科建議，做免疫固定，出現(xiàn)單克隆M蛋白，配合骨穿確診為多發(fā)性骨髓瘤，延緩或阻止患者由前期進入臨床期，為治療爭取了寶貴時間。
本組還有2例以心臟病就診，經(jīng)長期各項檢查未查出原發(fā)病，后經(jīng)血清蛋白電泳出現(xiàn)M帶，免疫固定IgGκ型。后診斷為大量輕鏈沉淀于心肌引起心肌淀粉樣變 導致的心臟病。
骨穿雖是診斷此病的金標準，但因它是局灶性病變，一次骨穿很難查出瘤細胞，況且多發(fā)性骨髓瘤患者的瘤細胞形態(tài)多種多樣，少部分患者的瘤細胞形態(tài)極不典型，很難用常規(guī)檢查方法證實為骨髓瘤細胞，而做免疫固定 就比較簡單方便，而且容易判斷結果。
多發(fā)性骨髓瘤多發(fā)于老年人，發(fā)生率隨年齡增大有增高趨勢，且病死率高達40% 。在我國日趨老齡化的同時，快速準確地診斷顯得日益重要。