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恙蟲病的診斷和檢查

  1.流行病學(xué)資料:應(yīng)注意發(fā)病前4~20天內(nèi)是否去過恙蟲病流行區(qū),是否曾在戶外工作,露天野營(yíng)或在灌木草叢中坐,臥等,同時(shí),還應(yīng)注意流行季節(jié),當(dāng)?shù)乇静〉牧餍星闆r等。

  2.臨床表現(xiàn):突然發(fā)病,畏寒或寒戰(zhàn),高熱,食欲缺乏,顏面潮紅,淺表淋巴結(jié)腫大,肝脾腫大,斑丘疹,并可發(fā)現(xiàn)特征性焦痂或潰瘍,對(duì)懷疑患本病的患者應(yīng)十分注意尋找焦痂或潰瘍,它多位于腫大,壓痛的淋巴結(jié)附近。

  3.實(shí)驗(yàn)室檢查:

  (1)血象:外周血液白細(xì)胞數(shù)多減少或正常,重型患者可稍增高,分類常有核左移現(xiàn)象。

  (2)血清學(xué)檢查:

  ①外-斐反應(yīng):

  外-斐反應(yīng)亦稱變形桿菌凝集試驗(yàn),患者血清中抗恙蟲病立克次體的抗體能與變形桿菌OXK抗原起凝集反應(yīng),為診斷提供依據(jù),病程第1周 末僅少數(shù)(30%左右)陽性,第2周末為75%左右,第3周可達(dá)90%左右,效價(jià)可達(dá)1∶160~1∶1280,第4周即開始下降,至第8~9周多轉(zhuǎn)為陰 性。

 ?、谘a(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn):

  陽性率較高,特異性較強(qiáng),且持續(xù)陽性時(shí)間較長(zhǎng),可達(dá)5年左右,需選用當(dāng)?shù)囟嘁娭曜骺乖?,也可采用多價(jià)抗原,因不同株的恙蟲病立克次體的抗原性可有較大差異。

 ?、勖庖邿晒饪贵w試驗(yàn):

  用間接免疫熒光抗體試驗(yàn)(indirect immunofluorescent antibody test,IFAT)檢測(cè)患者血清中特異性抗體,在病程的第1周末開始出現(xiàn)陽性,第2~3周末達(dá)高峰,60天后逐漸下降,但可持續(xù)數(shù)年,有病后10年檢測(cè) 仍呈陽性的報(bào)告。

 ?、馨唿c(diǎn)酶免疫測(cè)定:

  用各種血清型的恙蟲病立克次體或部分蛋白質(zhì)作為抗原,吸附在硝酸纖維膜上作斑點(diǎn)酶免疫測(cè)定(dot enzyme immunoassay,dot-EIA),檢測(cè)患者血清中各血清型的特異性IgG和IgM抗體,該法敏感度高,特異性強(qiáng),可區(qū)分各種血清型。

  ⑤酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)與酶免疫測(cè)定:

  以基因重組技術(shù)表達(dá)的恙蟲病立克次體分子量為56×103的蛋白質(zhì)作為抗原,用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme- linked immunosorbent assays,ELISA)與酶免疫測(cè)定(enzyme immunoassay,EIA)檢測(cè)患者血清中抗恙蟲病立克次體的IgG和IgM抗體,其敏感度為86%~88%,特異性為84%~90%。

  (3)病原學(xué)檢查:

 ?、俨≡w分離:

  常用小鼠作恙蟲病立克次體分離,可取患者的血液接種小鼠腹腔,每只接種0.5ml,多在接種后第7~9天發(fā)病,解剖瀕死的小鼠可發(fā)現(xiàn)雙肺充血,水腫,肝,脾,淋巴結(jié)充血腫脹,出現(xiàn)胸腔積液和腹水,取腹水涂片,腹膜,腸系膜,肝,脾或腎印片,干后用吉姆薩染色鏡檢(放大1000~1600倍),可于單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的胞質(zhì)中發(fā)現(xiàn)紫紅色,呈團(tuán)叢狀分 布的恙蟲病立克次體,當(dāng)一個(gè)恙蟲病立克次體侵入細(xì)胞后,在適宜的條件下可在局部胞質(zhì)中繁殖為一團(tuán),故常呈團(tuán)叢狀分布,若用抗恙蟲病立克次體抗體作免疫熒光試驗(yàn),在熒光顯微鏡下可見細(xì)胞內(nèi)有黃綠色的熒光。

  ②分子生物學(xué)檢查:

  根據(jù)恙蟲病立克次體編碼其分子量為56×103的主要表膜蛋白抗原的基因核苷酸序列,有人設(shè)計(jì)了各血清型間共同和不同的引物,用套式聚合酶鏈反應(yīng)(nested polymerase chain reaction,nested-PCR)檢測(cè)Gilliam,Karp,kato,kawasaki和kuroki五個(gè)血清型的相應(yīng)基因,具敏感度高, 特異性強(qiáng)的特點(diǎn),認(rèn)為可用于本病的診斷并鑒定血清型。


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