1.暗視野顯微鏡檢查
一期，二期梅毒和早期先天性梅毒應(yīng)采用暗視野顯微鏡檢查皮損分泌物中的蒼白密螺旋體，陽性者應(yīng)見到有規(guī)律螺旋運動的病原體，暗視野檢查簡便，快捷而準(zhǔn)確，一處皮損只有連續(xù)3次檢查后仍未發(fā)現(xiàn)梅毒螺旋體才能判為陰性，暗視野顯微鏡檢查法不適合用于口腔黏膜的損害，因為顯微鏡下見到的梅毒螺旋體無法與口腔中非致病的螺旋體區(qū)別，應(yīng)注意檢查前皮損部位不能外用抗生素，或使用含抗生素的生理鹽水作為檢查的載液，標(biāo)本中已死亡的梅毒螺旋體可用直接或間接免疫熒光染色或免疫過氧化物酶染色法鑒別。
2.血清試驗
根據(jù)所用的抗原不同分為兩類。
(1)非梅毒螺旋體抗原血清試驗(類脂質(zhì)血清反應(yīng))
用正常牛心肌的心磷脂(cardiolipin)為抗原，與梅毒患者血清中抗心磷脂抗體(即反應(yīng)素)結(jié)合，結(jié)合后發(fā)現(xiàn)凝集，生成絮狀物為陽性反應(yīng)，用于梅毒診斷，療效觀察和對復(fù)發(fā)或再感染的監(jiān)測，方法有。
?、傩圆嶒炇以囼?Venereal Disease Research Laboratory test，又稱VDRL試驗)
該試驗是1946年美國性病研究實驗室創(chuàng)建的，故以該實驗室命名，試驗在玻片上進(jìn)行，可以定性或半定量，低倍顯微鏡觀察結(jié)果。
?、诳焖傺獫{反應(yīng)素(rapid plasma reagin，RPR)試驗
為VDRL試驗的改良法，可使用血漿，原理是用未經(jīng)處理的活性炭顆粒(直徑3～5μm)吸附VDRL抗原，此顆粒若與待檢血清中的反應(yīng)素結(jié)合，便形成黑色凝集塊，肉眼即可識別，不需低倍鏡觀察，試驗在專用紙卡的反應(yīng)圈(內(nèi)徑18 mm)內(nèi)進(jìn)行，此試驗敏感性高，具一定特異性，而且經(jīng)濟(jì)，方便，快速，適合大規(guī)模篩選且能定性或半定量。
(2)梅毒螺旋體抗原血清試驗
用活的或死的梅毒螺旋體或其他成分作為抗原檢查抗梅毒螺旋體抗體，這種方法敏感性及特異性都高，用于證實試驗，尤其適用晚期梅毒，但血和腦脊液行RPR試驗均為陰性者，由于這類方法檢測的是抗梅毒螺旋體IgG抗體，即使患者已經(jīng)經(jīng)過充分的治療，IgG抗體仍保持陽性，所以不能用以觀察療效，復(fù)發(fā)及再感染。
?、贌晒饷苈菪w抗體吸收試驗(FTA-ABS試驗)
用間接免疫熒光法檢查血清中抗梅毒螺旋體抗體。
?、诿范韭菪w抗體微量血凝試驗(MHA-TP)
用梅毒螺旋體提取物致敏的紅細(xì)胞微量血凝分析法檢查相應(yīng)的抗梅毒螺旋體抗體，其滴度在1∶80以上則可判定為抗體陽性，此試驗的特異性與敏感性均高，而且方法比FTA-ABS試驗簡便，故應(yīng)用廣泛。
③梅毒螺旋體制動試驗(TPI)
活的梅毒螺旋體加入患者血清，在補(bǔ)體參與下，梅毒螺旋體活動可受到抑制。
梅毒血清試驗除技術(shù)性假陽性外，還有生物性假陽性反應(yīng)，這些反應(yīng)來自患者生理狀況的變化和其他的一些疾病，一些非梅毒的感染性疾病可引起急性生物學(xué)假陽性反應(yīng)，如麻疹，風(fēng)疹，水痘，牛痘疹，病毒性肝炎，傳染性單核細(xì)胞增多癥，上呼吸道感染，肺炎鏈球菌性肺炎，亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎，活動性肺結(jié)核，絲蟲病，瘧疾，錐蟲病，鼠咬熱，回歸熱及鉤端螺旋體病等，但這些病的血清反應(yīng)效價較低，且多在6個月內(nèi)轉(zhuǎn)為陰性，用梅毒螺旋體血凝試驗(TPHA)，F(xiàn)TA- ABS或TPI檢測，結(jié)果為陰性，另外一些能引起非螺旋體抗原血清試驗慢性生物學(xué)假陽性反應(yīng)的疾病有系統(tǒng)性紅斑狼瘡，盤狀紅斑狼瘡，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，風(fēng)濕性心臟病，麻風(fēng)，肝硬化，結(jié)節(jié)性多動脈炎，Sj?gren綜合征(干燥綜合征)，自身免疫性溶血性貧血，橋本甲狀腺炎，慢性腎炎，系統(tǒng)性硬化癥，麻醉品成癮 (主要是靜脈注射海洛因)，少數(shù)孕婦及老年人等。
能引起螺旋體抗原血清試驗慢性生物學(xué)假陽性反應(yīng)的疾病有系統(tǒng)性紅斑狼瘡，盤狀紅斑狼瘡，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，混合性結(jié)締組織病，硬皮病，淋巴肉瘤，腦膜瘤，肝硬化，自身免疫性溶血性貧血，結(jié)腸癌，接種牛痘，生殖器皰疹，糖尿病，海洛因成癮，妊娠等，假陽性反應(yīng)可持續(xù)數(shù)月或數(shù)年，甚至終身。
有1%～2%二期梅毒患者的非螺旋體抗原試驗如VDRL試驗顯示弱陽性，不典型或陰性結(jié)果，但將血清稀釋后再檢查反而呈陽性，這種現(xiàn)象稱前帶現(xiàn)象，原因是血清中抗心磷脂抗體過多，抑制了陽性反應(yīng)而出現(xiàn)假陰性的結(jié)果。
一些梅毒患者表現(xiàn)為耐血清性，即經(jīng)過抗梅毒治療后，非螺旋體抗原血清試驗在一定時期內(nèi)不轉(zhuǎn)為陰性，除部分患者是因為治療量不足，治療不規(guī)則，復(fù)發(fā)，再感染或有神經(jīng)梅毒屬于早期耐血清性耐繼續(xù)治療外，其余患者屬于晚期耐血清性，即患者雖已得到足夠的抗梅毒藥物和足夠的療程，抗體效價并不降低，若繼續(xù)給予更多的甚至無限期的治療也無法降低血清抗體效價，對這部分患者應(yīng)詳細(xì)體檢，排除神經(jīng)梅毒后，停止治療，定期隨訪。
3.腦脊液檢查
用于檢查神經(jīng)梅毒，腦脊液細(xì)胞數(shù)升高，白細(xì)胞數(shù)≥10×106/L，總蛋白升高，α2脂蛋白，α2巨球蛋白，IgG特別是IgM升高，膠體金試驗陽性，包括麻痹型或第一帶型，梅毒型或中間型，腦膜炎型或末帶型，抗心磷脂抗體試驗陽性，但部分活動性神經(jīng)梅毒可呈陰性反應(yīng)。
組織病理:若診斷證據(jù)不足時，可從皮膚，黏膜或其他組織器官的損害取材，進(jìn)行組織病理檢查，如發(fā)現(xiàn)梅毒的特異性病變，則有助于診斷，各期梅毒損害的組織病理基本相同，主要表現(xiàn)為小動脈及毛細(xì)血管內(nèi)膜炎及血管周圍炎，血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹和增生，最后導(dǎo)致血管腔阻塞，血管周圍有大量漿細(xì)胞，淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤，晚期梅毒除上述血管變化外，主要為肉芽腫變化，可有上皮樣細(xì)胞和巨細(xì)胞組成的浸潤，中央因血管梗死缺血，可引起干酪樣壞死，在愈合時出現(xiàn)成纖維細(xì)胞，形成纖維化和瘢痕形成。