幽門螺桿菌(Hp)是一種革蘭氏陰性微需氧菌,一般定植在胃黏膜上皮細胞表面,產生高活性的尿素酶。
尿素酶一方面直接損傷胃黏膜,另一方面分解尿素產生NH3,以保護Hp免受胃酸和胃蛋白酶的侵襲,而利用Hp的定植和生存。
幽門螺桿菌感染的檢查方法
1、細菌培養(yǎng)
直接將胃黏膜標本劃種到固體培養(yǎng)基上或將胃黏膜標本研磨成勻漿后接種,置微氧條件下,相對濕度90%以上,37℃孵育48~72h后觀察結果,至少依據(jù)涂片染色鏡檢,尿素酶,過氧化氫酶及氧化酶鑒定。
2、胃活檢黏膜涂片
將活檢黏膜面直接涂抹于清潔玻片上,自然干燥后革蘭染色或復紅染色,油鏡觀察。
3、組織切片染色
胃黏膜活檢標本(宜多點取材)垂直包埋切片,采用Warthin-Starry和Centa銀染色或HE染色,Giem sa染色,熒光素吖啶橙染色,米帕林染色以及無標記抗體PAP染色等在油鏡下或熒光顯微鏡下觀察。
4、尿素酶試驗
Hp具高度尿素酶活性,能分解尿素產生NH+4,通過測NH+4存在與否,間接判斷有否Hp感染,有pH指示劑法,分析化學法和同位素標記尿素試驗等方法。
5、4C尿素呼氣試驗
給患者口服14C尿素,如有Hp感染,20min后患者呼出的氣體中有14CO2,無Hp感染則無14CO2呼出,此試驗安全,準確,重復性好,但因設備等原因不易推廣應用。
6、血清學檢查
應用ELISA方法檢測血清或唾液中的抗Hp IgG或抗Hp IgA,為特異性和敏感性指標。
7、聚合酶鏈反應(PCR)技術
可檢測胃液,胃黏膜,唾液中Hp,陽性率高于尿素酶法。
8、原位鑒定
可應用單克隆抗體進行免疫組織化學檢測,Hp特異探針或引物進行原位雜交及PCR檢測。
組織切片染色
胃黏膜活檢標本(宜多點取材)垂直包埋切片,采用Warthin-Starry和centa銀染色或HE染色,Giemsa染色,熒光素吖啶橙染色,米帕林染色以及無標記抗體PAP染色等在油鏡下或熒光顯微鏡下觀察。
幽門螺桿菌(Hp)感染診斷方法
Hp感染的診斷有多種較為可靠的方法,可從檢測原理、檢測意義以及對人體有無創(chuàng)傷等多角度進行各種不同分類。一般依據(jù)對人體有無創(chuàng)傷分為侵入性和非侵入性診斷方法。侵入性診斷方法主要是依賴胃鏡活檢的方法,包括:快速尿素酶試驗(RUT)、胃黏膜直接涂片革蘭染色鏡檢、胃黏膜組織切片染色鏡檢、Hp培養(yǎng)、Hp基因檢測方法(如PCR、寡核苷酸探針雜交等);但活檢鉗消毒不嚴格可造成交叉污染。
而非侵入性檢測方法主要是指不需要內鏡檢查的方法,主要包括:13C或14C 尿素呼氣試驗(UBT)、15N尿氨排泄試驗、糞便Hp抗原檢測、Hp抗體檢測;該類方法無創(chuàng),病人依從性好。