什么是抗原抗體呢，在我們生活中想必大家對(duì)于抗原抗體還是有所了解的吧，那么大家知道抗原抗體是什么嗎，抗原抗體反應(yīng)是什么呢，抗原抗體結(jié)合原理是什么呢，下面就讓我們一起了解一下吧。
抗原與相應(yīng)抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)可以在體內(nèi)進(jìn)行，也可以在身體之外進(jìn)行?？乖贵w反應(yīng)過程是一系列的化學(xué)和物理變化，包括抗體特異性結(jié)合和非特異性聚集的2個(gè)階段，以及親水性膠體對(duì)疏水性膠體的變化。
特點(diǎn)
比例性是指抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系，只有當(dāng)二者濃度比例適當(dāng)時(shí)才出現(xiàn)可見反應(yīng)，在抗原抗體比例相當(dāng)或抗原稍過剩的情況下，反應(yīng)徹底，形成的免疫復(fù)合物沉淀多、大。而當(dāng)抗原抗體比例超過此范圍時(shí)，反應(yīng)速度和沉淀物量都會(huì)迅速降低甚至不出現(xiàn)抗原抗體反應(yīng)。
可逆性是指抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物后，在一定條件下又可解離恢復(fù)為抗原與抗體的特性。由于抗原抗體反應(yīng)是分子表面的非共價(jià)鍵結(jié)合，所形成的復(fù)合物并不牢固，可以隨時(shí)解離，解離后的抗原抗體仍保持原來的理化特征和生物學(xué)活性。
應(yīng)用
免疫動(dòng)物
(1)抗原
免疫動(dòng)物是制備抗血清的第一步。所使用的抗原的免疫反應(yīng)可以是病毒，細(xì)菌或其他蛋白質(zhì)的抗原，如果使用半抗原如小分子，如激素，必須與大分子載體連接。不同類型的抗原和動(dòng)物的抗原的量，注射小鼠可以作為一個(gè)小的幾微克，綿羊，甚至更大的動(dòng)物，每一次相應(yīng)的增加量，從幾百克/倍到幾毫克/倍。
〔2)佐劑及乳化
佐劑可以幫助抗原在注射部位緩慢釋放，以增加免疫刺激的效果。佐劑有完全和不完全佐劑之分。完全佐劑加有滅活的分枝桿菌(如卡介苗)或棒狀桿菌。福氏佐劑可從試劑公司購買，也可用羊毛脂和石蠟油按1：2—4混合自行制備。佐劑與抗原按1：1的比例混合乳化為均勻的乳液，放置后不會(huì)發(fā)生油水分離。
(3)免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物打豚鼠、家免、小鼠、大鼠等，如果大量生產(chǎn)可用動(dòng)物羊、馬等，動(dòng)物接受免疫的乳液量小鼠為1.0—2.0mL，家兔為2—4mL。抗原免疫動(dòng)物的途徑取決于動(dòng)物種類、抗原特性和是否使用佐劑。
腹腔注射(i.p)，肌肉注射(i.m)，皮內(nèi)注射(i.d.)和皮下注射(s.c.)適合于任何抗原，這些途徑主要刺激局部淋巴結(jié)發(fā)生免疫應(yīng)答，初次免疫和免疫加強(qiáng)注射均可使用。靜脈注射(i.v.)則只適合于可溶性抗原及分散的單細(xì)胞懸液，且不能使用佐劑，其誘發(fā)的免疫應(yīng)答主要發(fā)生在脾臟。
此外，在單克隆抗體制備時(shí)，亦可用脾臟直接注射或體外免疫方法，尤其對(duì)微量抗原比較實(shí)用。體外免疫方法也常用于人源單克隆抗體的制備。體外免疫時(shí)將脾細(xì)胞或外周血淋巴細(xì)胞(包括B細(xì)胞，T細(xì)胞及抗原遞呈細(xì)胞)與抗原一起作體外培養(yǎng)，然后再與骨髓瘤細(xì)胞融合。
初次免疫后要經(jīng)過2—3次以上的免疫加強(qiáng)以保證能形成較高水平的IgC抗體。兩次免疫注射之間的時(shí)間間隔，一般3—4周比較適合大部分動(dòng)物，小動(dòng)物可間隔10—14d，大動(dòng)物則在2月左右。在免疫加強(qiáng)后一次注射后的一周內(nèi)采集抗血清，可獲得高水平的抗體。
抗血清的純化與保存
(1)采血
加強(qiáng)免疫的動(dòng)物2—3次后，可通過耳靜脈或眼球(小鼠)采血，進(jìn)行抗血清效價(jià)測(cè)定。當(dāng)效價(jià)達(dá)到理想的高度后，可以采血。采血方式可以從心臟直接取血，也可通過動(dòng)脈放血。待血液凝固后用針筒或吸管吸取血清。
(2)抗血清的純化與保存
除抗體外血清中含有多種其他蛋白成分。為了避免這些蛋白質(zhì)干擾抗體(免疫球蛋白)標(biāo)記反應(yīng)和抗原抗體反應(yīng)，抗血清可經(jīng)過純化以獲得單一的機(jī)體(常為IgG)組分。常用的純化IgG的方法為飽和硫酸胺鹽析和層析法。
蛋白質(zhì)在不同的鹽濃度的溶液中，其溶解度不一樣，鹽離子干擾蛋白質(zhì)和水分子間氫鍵形成，因?yàn)樗?mdash;鹽結(jié)合比水—蛋白質(zhì)結(jié)合更穩(wěn)定，蛋白質(zhì)即可從溶液中沉淀出來。蛋白質(zhì)分子越大，沉淀時(shí)所需鹽離子濃度越低。
