dna聚合酶 dna聚合酶的功能與分類

  dna聚合酶是可以復(fù)制細(xì)胞DNA的一種重要作用酶。那dna聚合酶有什么功能呢?dna聚合酶的分類又有哪些呢?相信有許多人都是不知道的,不過(guò)沒關(guān)系,今天小編就來(lái)為大家一一解答一下。想知道的朋友不妨就來(lái)看一下吧。

  dna聚合酶功能

  dna聚合酶有哪些功能呢?對(duì)于很多人來(lái)說(shuō),dna聚合酶是陌生的。所以也不會(huì)知道dna聚合酶的功能。既然不知道,那下面小編就來(lái)為大家解答一下吧。

  一、聚合作用

  在引物RNA'-OH末端,以dNTP為底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個(gè)將核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。

  酶的專一性主要表現(xiàn)為新進(jìn)入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對(duì)時(shí)才有催化作用。dNTP進(jìn)入結(jié)合位點(diǎn)后,可能使酶的構(gòu)象發(fā)生變化,促進(jìn)3'-OH與5'-PO4結(jié)合生成磷酸二酯鍵。

  如果是錯(cuò)誤的核苷酸進(jìn)入結(jié)合位點(diǎn)的話,則是不能與模版配對(duì)的,因此也無(wú)法改變酶的構(gòu)象而被3'-5'外切酶活性位點(diǎn)所識(shí)別并切除之。

  二、3'→5'外切酶活性──校對(duì)作用

  這種酶活性的主要功能是從3'→5'方向識(shí)別和切除不配對(duì)的DNA生長(zhǎng)鏈末端的核苷酸。當(dāng)反應(yīng)體系中沒有反應(yīng)底物dNTP時(shí),由于沒有聚合作用而出現(xiàn)暫時(shí)的游離現(xiàn)象,從而被3'→5'外切酶活性所降解。

  如果提高反應(yīng)體系的溫度可以促進(jìn)這種作用,這表明溫度升高使DNA生長(zhǎng)鏈3'末端與模板發(fā)生分離的機(jī)會(huì)更多,因而降解作用加強(qiáng)。

  當(dāng)向反應(yīng)體系加入dNTP,而且只加放與模板互補(bǔ)的上述核苷酸才會(huì)使這種外切酶活性受到抑制,并繼續(xù)進(jìn)行DNA的合成。

  由以上結(jié)論可退出,3'-5'外切酶活性的主要功能就是校隊(duì)作用,并且當(dāng)加入核苷酸與模版不互補(bǔ)而游離時(shí),則是會(huì)被3'-5'外切酶切除,以便重新在這個(gè)位置上聚合對(duì)應(yīng)的核苷酸。

  在某些T4噬菌體突變株中DNA復(fù)制的真實(shí)性降低,而易發(fā)生突變,從此突變株分離得到的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性很低。

  相反,另外一些具有抗突變能力的T4突變株中的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA復(fù)制真實(shí)性好,變異率低??梢?,3'→5'外切酶活性對(duì)DNA復(fù)制真實(shí)性的維持是十分重要的。

  三、5'→3'外切酶活性──切除修復(fù)作用

  5'→3'外切酶活性就是從5'→3'方向水解DNA生長(zhǎng)鏈前方的DNA鏈,主要產(chǎn)生5'-脫氧核苷酸。這種酶活性只對(duì)DNA上配對(duì)部分(雙鏈)磷酸二酯鍵有切割活力作用,方向是5'→3'。

  每次能切除10個(gè)核苷酸,而且DNA的聚合作用能刺激5'→3'外切酶活力達(dá)10倍以上。因此,這種酶活性在DNA損傷的修復(fù)中可能起著重要作用。對(duì)岡崎片段5'末端RNA引物的去除依賴此種外切酶活性。

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