3.鑒別方法
AOB的外觀為黃色或棕黃色的粉末或顆粒，可溶于水和乙醇，略溶于丙酮、正丁醇、乙酸乙酯等;AOB有吸濕性，在干燥狀態(tài)時相當(dāng)穩(wěn)定?；瘜W(xué)試劑鑒別：取本品0.5g溶于100mL95%的乙醇中，按下法鑒別：取上述溶液1mL，加1%FeCl3-乙醇溶液2～3滴，應(yīng)顯深藍(lán)色或藍(lán)紫色。取上述溶液1mL，加1%AlCl3-乙醇溶液2～3滴，應(yīng)呈鮮黃色;取本品0.5g，加入10mL乙醚，超聲波輔助萃取30秒，過濾。取濾液1mL，置70～90℃的水浴中揮干乙醚后，依次加入2%的間二硝基苯溶液(用95%乙醇配制)和2.5mol/L的KOH水溶液各1mL，立即出現(xiàn)微紅色，放入上述熱水浴中，迅速變成深紫紅色。經(jīng)溴化鉀壓片后的紅外光譜圖顯示，在3400、2900、1610、1520、1080cm-1等附近有特征性吸收。將其溶于光譜純甲醇后，在200～600nm的波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，紫外光譜圖顯示，在240～400nm區(qū)域有兩個主要的吸收峰，其中在240～280nm之間有一強(qiáng)吸收峰，在300～350nm之間有一次強(qiáng)吸收峰，呈現(xiàn)了植物黃酮制劑的典型特征。
4.安全性評價
竹葉在中國乃至東南亞的廣大地區(qū)有著長期的食用和藥用歷史，1998年(淡)竹葉被衛(wèi)生部批準(zhǔn)列入了“藥食兩用的天然物名單”，以竹葉黃酮為內(nèi)容物的“竹康寧”膠囊和片劑也分別于1999年和2002年獲得了保健食品的批準(zhǔn)文號。
浙江省疾病預(yù)防控制中心按照衛(wèi)生部GB15193-1994《食品安全性毒理學(xué)評價程序和方法》對力夫牌竹葉抗氧化。
竹葉物(AOB)進(jìn)行了為期一年多的試驗研究，結(jié)果表明：第一階段大、小鼠急性及口毒性半數(shù)致死量(LD50)雌雄兩性均大于10000mg/kg體重，按急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)判定，屬實際無毒類。第二階段Ames試驗結(jié)果為陰性，小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗和小鼠精子畸形試驗結(jié)果均為陰性，提示該樣品無致突變性。第三階段大鼠90天喂養(yǎng)試驗設(shè)低、中、高三個劑量組，分別相當(dāng)于人大可能攝入量(860mg/d)的100、200、300倍，試驗結(jié)果表明，各項指標(biāo)均未見明顯毒性反應(yīng)，AOB的大無作用劑量為4.3g/kg體重;傳統(tǒng)致畸試驗顯示各劑量組各項指標(biāo)均未見有明顯的母體毒性和胚胎毒性、致畸性;大鼠一代繁殖試驗?zāi)阁w效應(yīng)、胎仔效應(yīng)各項指標(biāo)均未見明顯毒性反應(yīng)。代謝試驗表明，AOB中四種碳苷黃酮在大鼠胃腸道內(nèi)均無直接吸收，灌胃后各個時相血漿和主要組織器官(肝、腎、腦及肌肉組織)均無檢出，灌胃后0.5h、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h、12h在胃腸道及其內(nèi)容物中，四種碳苷的回收率分別為83.3%、68.8%、65.0%、61.1%、59.9%、59.1%、57.8%、53.7%、51.7%;一次性灌胃給予受試物，24h后從糞便中檢出的原型物占攝入量的27.6%，尿液中未見原形物排出。AOB中的另一主要羥基香豆素類組分則主要經(jīng)血液途徑吸收。灌胃后各時相在大鼠肝臟、腦及肌肉組織均無檢出，在血液及腎臟從有檢出;給予受試物24h后該組分在尿液中檢出1.9%，在糞便中未檢出。
