同工酵素
同工酵素(isoenzyme)的概念:即同工酵素是一類(lèi)催化相同的化學(xué)反應(yīng),但酵素蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和免疫原性各不相同的一類(lèi)酵素。它們存在于生物的同一種族或同一個(gè)體的不同組織,甚至在同一組織、同一細(xì)胞的不同細(xì)胞器中。至今已知的同工酵素已不下幾十種,如己糖激酵素,乳酸脫氫酵素等,其中以乳酸脫氫酵素(Lactic acid dehydrogenase,LDH)研究得為清楚。人和脊柱動(dòng)物組織中,有五種分子形式,它們催化下列相同的化學(xué)反應(yīng):
五種同工酵素均由四個(gè)亞基組成。LDH的亞基有骨骼肌型(M型)和心肌型(H型)之分,兩型亞基的氨基酸組成不同,由兩種亞基以不同比例組成的四聚體,存在五種LDH形式.即H4(LDHl)、H3M1(LDH2)、H2M2 (LDH3)、H1M3(LDH4)和M4 (LDH5)。
M、H亞基的氨基酸組成不同,這是由基因不同所決定。五種LDH中的M、H亞基比例各異,決定了它們理化性質(zhì)的差別.通常用電冰法可把五種LDH分開(kāi),LDH1向正極泳動(dòng)速度快,而LDH5泳動(dòng)慢,其它幾種介于兩者之間,依次為L(zhǎng)DH2.LDH3和LDH4(圖4-5) 圖4-5還說(shuō)明了不同組織中各種LDH所含的量不同,心肌中以LDHl及LDH2的量較多,而骨骼肌及肝中LDH5和LDH4為主.不同組織中LDH同工酵素譜的差異與組織利用乳酸的生理過(guò)程有關(guān).LDH1和LDH2對(duì)乳酸的親和力大,使乳酸脫氫氧化成丙酮酸,有利于心肌從乳酸氧化中取得能量。LDH5和LDH4對(duì)丙酮酸的親和力大,有使丙酮酸還原為乳酸的作用,這與肌肉在無(wú)氧酵解中取得能量的生理過(guò)程相適應(yīng)(詳見(jiàn)糖代謝章).在組織病變時(shí)這些同工酵素釋放入血,由于同工酵素在組織器官中分布差異,因此血清同工酵素譜就有了變化。故臨床常用血清同工酵素譜分析來(lái)診斷疾病(圖4-5)。
別構(gòu)酵素
別構(gòu)酵素(allosteric enzyme)往往是具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的多亞基的寡聚酵素,酵素分子中除有催化作用的活性中心也稱(chēng)催化位點(diǎn)(catalytic site)外;還有別構(gòu)位點(diǎn)(allosteric site).后者是結(jié)合別構(gòu)劑(allesteric effector)的位置,當(dāng)它與別構(gòu)劑結(jié)合時(shí),酵素的分子構(gòu)象就會(huì)發(fā)生輕微變化,影響到催化位點(diǎn)對(duì)底物的親和力和催化效率。若別構(gòu)劑結(jié)合使酵素與底物親和力或催化效率增高的稱(chēng)為別構(gòu)激活劑(allostericactivator),反之使酵素底物的r親和力或催化效率降低的稱(chēng)為別構(gòu)抑制劑(allostericinhibitor)。酵素活性受別構(gòu)劑調(diào)節(jié)的作用稱(chēng)為別構(gòu)調(diào)節(jié)(allosteric regulation)作用.別構(gòu)酵素的催化位點(diǎn)與別構(gòu)位點(diǎn)可共處一個(gè)亞基的不同部位,但更多的是分別處于不同亞基上.在后一種情況下具催化位點(diǎn)的亞基稱(chēng)催化亞基,而具別構(gòu)位點(diǎn)的稱(chēng)調(diào)節(jié)亞基。多數(shù)別構(gòu)酵素處于代謝途徑的開(kāi)端,而別構(gòu)酵素的別構(gòu)劑往往是一些生理性小分子及該酵素作用的底物或該代謝途徑的中間產(chǎn)物或終產(chǎn)物。故別構(gòu)酵素的催化活性受細(xì)胞內(nèi)底物濃度、代謝中間物或終產(chǎn)物濃度的調(diào)節(jié)。終產(chǎn)物抑制該途徑中的別構(gòu)酵素稱(chēng)反饋抑制(feedback inhibition).說(shuō)明一旦細(xì)胞內(nèi)終產(chǎn)物增多,它作為別構(gòu)抑制劑抑制處于代謝途徑起始的酵素,及時(shí)調(diào)整該代謝途徑的速度,以適應(yīng)細(xì)胞生理機(jī)能的需要。別構(gòu)酵素在細(xì)胞物質(zhì)代謝上的調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。故別構(gòu)酵素又稱(chēng)調(diào)節(jié)酵素。(regulatory enzyme)