理化鑒別中常用的分析方法有化學(xué)分析法和薄層色譜法。
對(duì)比了蛇膽汁和雞膽汁中的氨基酸及微量元素，發(fā)現(xiàn)蛇膽汁與雞膽汁均含有18種氨基酸，雞膽汁中除了牛磺酸含量略低于蛇膽汁外，其他氨基酸的種類和含量非常相似;蛇膽汁中微量元素Ca、Mg、Fe、Zn、Cu的含量均略高于雞膽汁。
通過(guò)膽囊外觀性狀，膽汁的K2Cr2O7沉淀、糠醛-硫酸顯色反應(yīng)以及薄層色譜法(TLC)，鑒別了眼鏡蛇膽檢品，認(rèn)為該方法簡(jiǎn)單、專屬性強(qiáng)，可作為真?zhèn)紊吣懙蔫b別方法。
用糠醛-硫酸法鑒別了蛇膽及其偽品雞膽、鴨膽、魚(yú)膽等，認(rèn)為該法結(jié)果可靠，簡(jiǎn)便易行，但不能鑒別蛇類種屬。薄層層析法由于具備色譜分離特性，因此更適合分析復(fù)雜樣品。
以牛磺膽酸為對(duì)照用薄層層析法分析了眼鏡蛇蛇膽樣品并見(jiàn)到8個(gè)顯色斑點(diǎn)。
此外，TLC法還被廣泛用于蛇膽復(fù)方制劑的鑒別研究。
綜上所述，?；悄懰岬瘸煞譃閷?duì)照用TLC法可有效鑒別出復(fù)方制劑中的蛇膽，但不能區(qū)別蛇膽的種屬來(lái)源。
1.4分子生物學(xué)鑒定
由于蛇膽保存和制劑加工過(guò)程中的處理方法往往破壞了蛇膽的完整性，因此依據(jù)性狀、顯微特征及理化性質(zhì)進(jìn)行鑒別有一定困難，分子生物學(xué)方法能克服上述問(wèn)題，呈現(xiàn)更客觀的結(jié)果。眾所周知，物種的多樣性是基因多態(tài)性的結(jié)果，而基因多態(tài)性可在分子水平上檢測(cè)，它比在形態(tài)、組織和化學(xué)水平上檢測(cè)更能代表其變異類型的遺傳標(biāo)記。
將分子標(biāo)記技術(shù)運(yùn)用到蛇類藥材的鑒定研究中，對(duì)游蛇科10種蛇基因組DNA的多態(tài)性進(jìn)行了分子遺傳標(biāo)記的研究;通過(guò)提取金錢白花蛇及其偽品藥材和原動(dòng)物樣品的模板DNA，分析其Cytb基因片斷鑒別了金錢白花蛇。
分子生物學(xué)鑒別方法雖能有效鑒別出蛇類藥材的種屬來(lái)源，目前在蛇類藥材的鑒別中應(yīng)用較廣，但由于市售蛇膽樣品的復(fù)雜性，蛇膽DNA的含量較低，故此法在蛇膽鑒別中的應(yīng)用較少，具體應(yīng)用方案還有待于進(jìn)一步完善。
蛇膽及其制劑的含量測(cè)定
目前蛇膽藥材及其制劑中蛇膽的含量測(cè)定多以總膽酸或?；悄懰猁}為指標(biāo)，測(cè)定方法主要是紫外分光光度法、薄層掃描法(TLCS)和高效液相色譜法(HPLC)。
